Бешенство у собак: симптомы, признаки, что делать если укусила собака. Бешенство у собак — как предотвратить смертельное заболевание? Как правильно вакцинировать собак от бешенства

Бешенство (рабиес) - опасное инфекционное заболевание со смертельным исходом, которое вызывает рабдовирус Rabies virus. Ранее рабиес называли гидрофобией, водобоязнью.

Причины патологии

В организм здорового пса Rabies virus заносится со слюной инфицированной особи. В основном заражение происходит посредством укусов (наиболее опасны укусы в голову и шею), реже - при ослюнении или просто контакте через микроповреждения, имеющиеся на теле домашнего питомца.

Основным резервуаром инфекции являются представители дикого животного мира. Так, представляют опасность особи, обитающие в лесах, а также в эпизоотологически неблагополучных регионах. Опасность заражения существует повсеместно, даже в городской среде. Именно поэтому хозяин собаки со свободным выгулом должен быть бдителен - его четвероногий друг не застрахован от встречи с инфицированным бродячим животным, а следовательно, от поражения его организма рабдовирусом.

Механизм развития заболевания заключается в следующем: Rabies virus стремительно продвигается по длинным отросткам нейронов и вызывая поражения спинного и головного мозга. В результате его активности происходят необратимые изменения в мозговых тканях.

Вирус стабилен во внешней среде и к дезинфицирующим средствам. В замороженном состоянии Rabies virus хранится до полугода. При кипячении, при температуре 100 градусов и выше погибает.

Клиническая картина

Симптоматику рабиес у собаки можно наблюдать обычно через 3-7 недели после проникновения вируса в ее организм. Однако в ветеринарии зафиксированы факты, когда длительность инкубационного периода составляла 6 месяцев и даже год. Это зависит от двух факторов: уровня степени способности вируса заражать организм, а также стойкостью иммунной системы собаки.

К общим признакам бешенства относятся общее истощение, саливация, косоглазие, изменение поведения. Далее следует ожидать паралича задних конечностей, дыхательной мускулатуры, сердца. В результате этих явлений неизбежно наступает летальный исход.

Ветеринары выделяют несколько форм бешенства у собак, для каждой из которых характерны специфические симптомы.

Самой распространенной формой заболевания является буйная, подразделяющаяся на три стадии.

Начальная (продромальная) протекает практически бессимптомно. Пес ведет себя так, словно обиделся на человека, перестает общаться, прячется. Впрочем, бывает и наоборот, когда необщительная собака вдруг начинает проявлять повышенное дружелюбие, облизывает руки и требует общения и ласки. Внимательный хозяин обязательно обратит внимание на перемены поведения четвероногого любимца. Уже на 2-3-е сутки появляется саливация, тяжелое дыхание, зевота из-за нехватки кислорода.

Для маниакальной стадии характерны проявления агрессии, неадекватность поведения, немотивированная злоба. Питомец нападает на людей, грызет вещи и испытывает интерес к несъедобным предметам, старается укрыться в укромном местечке. Его поведение не поддается коррекции.

Полная парализация также проходит без агрессии. Собака боится света и шума, отказывается от воды и пищи в связи с развивающейся парализацией глотательного аппарата. Паралич захватывает мышцы конечностей, из-за чего появляется хромота, а затем и внутренние органы. Наступает кома и, как следствие, летальный исход.

Существуют следующие формы бешенства:

1. Атипичная. Длится от 3 до 6 месяцев. Симптомы: рвота, диарея, слабость, истощение. Агрессия отсутствует.
2. Депрессивная с продолжительностью до 5 дней. Признаки: стремительное ухудшение состояния, кашель, слюноотделение, паралич внутренних органов.
3. Возвратная. Приступообразное течение заболевание. Приступы то пропадают, то возобновляются. Длится всего несколько суток.
4. Абортивная (мало изучена). Собака с симптомами заражения исцеляется в самопроизвольном порядке без последствий для организма. Однако данная форма встречается единично, поэтому надеяться на чудо не стоит бессмысленно.

Заметив у своего домашнего питомца признаки опасного заболевания, владелец обязан немедленно отвезти его в ветклинику.

Диагностика

Задача ветеринара - дифференцировать бешенство от других заболеваний: болезни Ауески (псевдобешенство), энцефалита, чумки плотоядных. В двух последних случаях при своевременном обращении в клинику собаку можно спасти.

Предварительный диагноз ставится на основании внешнего осмотра животного, лабораторных и патолого-анатомических данных, а также полученной по региону эпизоотологической информации. Точный диагноз можно поставить только после смерти животного. Опровержение или подтверждение бешенства происходит на основе исследования гистологических образцов головного мозга на наличие специфических телец Бабеша-Негри.

Методика лечения и прогноз

Бешенство является неизлечимой болезнью. Нет препаратов, способных победить этот страшный недуг. По обращению в ветеринарную клинику собака помещается на карантин продолжительностью 10 дней. Она содержится в вольере, общение с другими животными запрещено. За этот период времени у нее проявляются или не развиваются признаки бешенства. Никакие анализы у пациента не берут, так как собака представляет серьезную угрозу для сотрудников ветклиники.

Лечить прогрессирующую болезнь бесполезно, поэтому единственным гуманным способом избавить животное от мучений, является эвтаназия.

Что делать в домашних условиях

Если на ваших глазах ваш домашний питомец вступил в стычку с бродячим животным и был покусан им, ни в коем случае нельзя игнорировать инцидент. Пострадавшего пса следует отвести домой, и выполнить следующие манипуляции:

1. Надеть намордник на животное.
2. Произвести визуальный осмотр.
3. Остричь шерстяной покров вокруг пораженной области.
4. Повреждения промыть горячей водой с хозяйственным мылом. Напор воды должен быть сильным.
5. Произвести обработку краев раны зеленкой или перекисью водорода.

Процедуру нужно выполнять в резиновых перчатках и соблюдать меры предосторожности.

Далее нужно изолировать собаку в отдельном помещении и исключить ее общение с членами семьи, другими животными. По возможности нужно вызвать ветеринара на дом. При отсутствии такой возможности питомца нужно срочно отвезти в ветеринарную клинику для диагностики заболевания. Там животному введут антирабическую вакцину, а спустя две недели, проведут ревакцинацию. Через 10 дней будет известно, заражен ли пес бешенством или нет.

Нельзя ухаживать за четвероногим любимцем самостоятельно - этим вы подвергаете себя смертельному риску! Бешенство - смертельно опасное заболевание, которое передается людям.

Профилактические мероприятия

Надежным и проверенным десятилетиями методом профилактики бешенства считается вакцинация. Она на 100% защищает животных от смертельно опасного вируса. Инфицирование может произойти в двух случаях: вирус проник в организм еще до начала действия вакцины или просрочен препарат.

Если вакцина высокого качества и введена своевременно, согласно прививочному графику, бешенство собаке не угрожает.

В России наиболее популярными вакцинами являются Рабизин, Гексадог, Нобивак, Пентадог.

Ревакцинация осуществляется каждый год, но стойкий иммунитет к болезни вырабатывается после третьей прививки (к третьему году жизни). Нужно иметь в виду, что если собака была укушена еще до того, как ее иммунная система начала адекватно реагировать на вирус, развитие заболевания исключать нельзя.

Животных, у которых отсутствует прививка, не допускают к участию в кинологических выставках, не привлекают к службе в государственных органах. Их нельзя перевозить наземным и воздушным транспортом. Также они не подлежат вывозу на охоту. Запись о прививках бешенством обязательно должна иметься в ветпаспорте.

Чтобы оградить своего домашнего питомца от действия Rabies virus, владелец должен соблюдать простейшие правила безопасности. Во время выгула следует исключить общение домашнего пса с бродячими животными. После прогулок собаку нужно осматривать, а при укусах и прочих повреждениях кожного покрова промывать рану мыльным раствором.

Каковы действия человека, если его укусило животное с подозрением на бешенство? Раньше такому пациенту нужно было срочно обращаться в лечебное учреждение для постановки 40 уколов. Необходимость обращения в травмпункт не отменяется, однако для профилактики ставят 7 вакцин.

Вакцинирование, осуществленное до проявления симптомов бешенства, дает гарантию выздоровления 100%. Предварительно следует обработать рану в домашних условиях с помощью мыльного раствора, продезинфицировать и забинтовать.

Бешенство (Б) – остро протекающая болезнь теплокровных животных, характеризующаяся поражением ЦНС. Восприимчивы домашние и дикие животные всех видов, а также человек.

Болезнь регистрируется в различных регионах земного шара. Не отмечено случаев распространения болезни в Австралии, Великобритании, Японии. Заболевание почти всегда заканчивается смертью. Имеются фактически документированные случаи выздоровления от бешенства человека и собак после экспериментальной инфекции.

Вирус бешенства (ВБ) относится к семейству Rhabdoviridae, роду Lyssavirus. В настоящее время установлено, что ВБ имеет 4 серотипа, что обусловлено, видимо, различием в составе мембранных белков. Все варианты ВБ в иммунобиологическом отношении родственны, но различаются по вирулентности. ВБ обладает ГА и ГАД свойствами. Между инфекционной и ГА активностью существует линейная зависимость. Животные, иммунизированные против бешенства, продуцируют ВНА, КСА, антиГА и литические (разрушающие клетки, зараженные вирусом в присутствии комплемента) АТ.

Диагноз ставят на основании эпизоотологических данных, симптомов болезни, патологоанатомических изменений (они имеют меньшее значение) и, главным образом, результа­тов лабораторных исследований.

Лабораторная диагностика заключается в исследовании головного мозга животных с целью выявления вирусного АГ в ИФ, РДП, обнаружении те­лец Бабеша - Негри и биопробе на белых мышах.

В Российской Федерации в настоящее время организовано производство наборов для диагностики Б в ИФ и РДП в ВНИТИБП и КазНИВИ.

Выделение вируса. В лабораторию для исследования направляют свежие трупы мел­ких животных, от крупных животных - голову или головной мозг. В некоторых случаях до­пускается консервирование головного мозга в 50%-ном глицерине. Труп или голова должны быть тщательно упакованы в полиэтиленовый мешок, мозг - в банку с притертой стеклянной или резиновой пробкой, залитой парафином. Материал упаковывается во влагонепроницае­мую тару. Для вирусологических исследований пригоден только не консервированный мозг. Необходимо помнить, что вскрытие трупа, извлечение мозга и другие операции с патологи­ческим материалом следует проводить в условиях стерильности и строгого соблюдения мер личной профилактики: прочно фиксируют голову животного, защищают руки 2-мя парами перчаток (хирургические и анатомические), для защиты глаз надевают очки, а на нос и рот-6-слойную марлевую повязку.

Лабораторные исследования материала на бешенство проводят вне всякой очереди; результаты немедленно сообщают врачу хозяйства и главному врачу района (города).

Индикация и идентификация вируса . Порядок проведения исследований: из каждого отдела головного мозга левой и правой сторон (аммонова рога, мозжечка, коры полушарий и продолговатого) готовят по 4 мазка-отпечатки для ИФ и обнаружения телец Бабеша - Негри; с мозговой тканью ставят РДП; при отрицательных результатах ставят биопробу.

Обнаружение специфических телец-включений . Мазки-отпечатки окрашивают по Селлерсу, Муромцеву или другими методами. После окрашивания препараты просматрива­ют в световом микроскопе с иммерсионной системой. Положительным результатом считают наличие специфических телец Бабеша - Негри (при окраске по Селлерсу - четко очерченные овальные или продолговатые гранулярные образования розово-красного цвета в протоплаз­ме, при окраске по Муромцеву - светло-фиолетовые с темно-синими включениями тельца Бабеша - Негри, чаще они расположены вне нервных клеток.

Наиболее характерная особенность телец Бабеша - Негри - их внутренняя структура, по­зволяющая абсолютно точно дифференцировать их. Внутри видны маленькие зернышки - базофильные зернистости темно-голубого, даже черного цвета величиной 0,2-0,5 мкм.

Диагностическая ценность обнаружения телец-включений для доказательства заражения ВБ общепризнана. Однако и у здоровых животных, в особенности у кошек и белых мышей, имеются образования, присутствие которых может вызвать диагностические затруднения. В отдельных случаях в мозге кошки можно с уверенностью дифференцировать подобные включения от телец Бабеша - Негри, и здесь рекомендуется воспользоваться методами иден­тификации, в особенности ИФ. Равным образом и у собак, погибших в результате отравле­ния змеиным ядом или поражения электрическим током, можно найти тельца-включения, напоминающие тельца Бабеша – Негри. Тельца Бабеша - Негри выявляют лишь в 65-85% случаев бешенства, поэтому отсутствие их не является отрицательным ответом, и материал исследу­ется в других тестах (ИФ, РДП, биопроба).

ИФ. Один из основных тестов при диагностике Б. При высококвалифицированном вы­полнении получают в 99-100% совпадения с методом биопробы. Обычно в диагностической практике используют прямой метод ИФ, который проводят с применением антирабического флюоресцирующего Ig. Фиксацию препаратов в охлажденном (8-10°С) ацетоне проводят не менее 4-х ч. В качестве отрицательного контроля используют мазки-отпечатки головного мозга здоровых белых мышей. Учитывают результаты визуально в люминесцентном микро­скопе на основе оценки интенсивности свечения комплекса АГ-АТ. АГ ВБ выявляется в ви­де ярких желто-зеленых или зеленых гранул различной формы и величины в клетках (чаще вне клеток). Диагноз считают установленным, если в нескольких полях зрения обнаружи­вают достаточное количество (не менее 10) типичных гранул с ярким зеленым свечением или множество мельчайших точек, В контроле подобного свечения не должно быть.

Для доказательства специфичности свечения комплекса АГ-АТ используют метод по­давления ИФ, который заключается в способности рабического АГ, связанного с нефлюоресцирующими AT, вторично не вступать в соединение с флюоресцирующими специфиче­скими AT. Для этого на фиксированные препараты, приготовленные из исследуемого голов­ного мозга, наносят 5%-ный антирабический нефлюоресцирующий Ig, выдерживают 30 мин при 37°С во влажной камере, промывают физраствором, а затем окрашивают флюоресци­рующим антирабическим Ig общепринятым прямым методом. В обработанных таким обра­зом препаратах флюоресценции не должно быть.

Метод ИФ дает возможность обнаруживать ВБ в клетках роговицы глаз и предвари­тельно поставить диагноз прижизненно: во время болезни животных, а также за 1-2 дня и более до клинического её проявления. Метод может быть использован для исследования по­дозреваемых в заболевании Б животных, а также клинически здоровых собак и кошек, по­кусавших людей и животных. Для этого готовят отпечатки с роговицы, соблюдая все прави­ла личной безопасности, раскрывают глазную щель животного большим и указательным пальцами и на слегка выпяченное глазное яблоко надавливают поверхностью предметного стекла, отступив 0,5 см от конца. Нужно следить, чтобы животное не моргало третьим ве­ком, так как со стекла удаляются эпителиальные клетки и получается некачественный мазок. С каждого глаза делают не менее 2 препаратов, содержащих по 2 отпечатка. Для кон­троля аналогичным образом готовят отпечатки роговицы от здоровых животных. Их можно приготовить в хозяйстве. Отпечатки высушивают на воздухе, фиксируют в ацетоне в тече­ние 4 ч при 4°С, упаковывают и отправляют в лабораторию. Окрашивают препараты, как при ИФ, по общепринятой методике.

В препаратах, полученных от больных животных или находящихся в конце инкубаци­онного периода болезни, в цитоплазме многих эпителиальных клеток наблюдаются разной формы ярко светящиеся гранулы разного размера - от пылевидных точек до 2 мкм и более. С целью получения достоверных результатов в каждом препарате просматривают по 50-100 клеток, а всего от животного - не менее 200-400 клеток. Результаты микроскопии считают положительными, если в отпечатках роговицы животного обнаруживают 11% и более кле­ток с характерными очажками свечения. Необходимо иметь в виду, что в препаратах от здо­ровых животных (контроль), вследствие аутофлюоресценции, могут встречаться единичные клетки с подобными по форме и свечению очажками.

Важно отметить, что ИФ дает возможность ускорить ответ при окончательной постанов­ке диагноза путем биопробы, поскольку диагноз при Б может быть установлен только на 4-8-й день после заражения мышей исследуемым материалом, а инкубационный период забо­левания мышей может достигать и 20 дн. ИФ может выявлять ВБ в тканях подчелюстной слюнной железы. Из подчелюстных слюнных желез готовят препараты-мазки, беря матери­ал не менее чем из 6 разных участков железы, так как распределение в ней вируса нерав­номерно. Часто, чтобы получить отпечаток, приходится делать сильный нажим, поскольку из-за обилия муцина на стекле остается мало материала.

Показана возможность идентификации ВБ в коже методом ИФ, С этой целью берут пробы кожи головы, а также фолликулы сенсорных и тактильных волос морды или лате­ральных сенсорных сосочков (на щеке собаки). Пробы хранят при -20 или -70°С. Из них де­лают криосрезы, которые обрабатывают флюоресцирующим глобулином. Результаты ИФ анализа, полученные при идентификации ВБ в коже, в высокой степени коррелируют с дан­ными, полученными при исследовании мозга того же животного. Показана близкая корре­ляция между обнаружением АГ вируса в пробах мозга и тканях губы методом ИФ.

РДП. Применяют для обнаружения АГ ВБ в неконсервированном головном мозге жи­вотных, павших от уличного бешенства, или мышат, используемых в биопробе. РДП ставят микро­методом на предметных стеклах, используя 1-1,5%-ныЙ агаровый гель по общепринятой ме­тодике. Наибольший процент положительных результатов выявляют при использовании следующего трафарета: А - аммонов рог (правая сторона); В - кора головного мозга (правая сторона); С - мозжечок (правая сторона);
Д - продолговатый мозг (правая сторона); + (плюс) - положительный контроль; - (минус) - отрицательный контроль; 1, 2, 3, 4 - лунки с разведе­нием специфического иммуноглобулина 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 соответственно

Из каждого отдела головного мозга с помощью пинцета готовят гомогенную пастооб­разную массу, которую и помещают в соответствующие лунки. От мышей исследуют весь головной мозг. Из отделов головного мозга левой стороны готовят АГ аналогичным образом (на каждую экспертизу в общей сложности требуется 4 предметных стекла с агаровьм ге­лем). Реакцию учитывают через 6, 24, 48 ч. При наличии 1 или 2-3 линий преципитации между лунками, содержащими АГ и иммуноглобулин, реакцию считают положительной.

РДП проста по выполнению и специфична, но процент выявления вирусного АГ в ис­следуемом материале составляет 45-70. При исследовании головного мозга мышей, полу­ченного при положительной биопробе, РДП выявляет до 100% случаев. Отсутствие в иссле­дуемом материале телец Бабеша - Негри, специфической флюоресценции и отрицательная РДП не дают основания исключить наличие вируса. В этом случае окончательный диагноз ставят по результатам биопробы на белых мышах с последующей идентификацией вируса.

Биопроба. Принято считать, что биопроба является более эффективным методом, чем обнаружение телец Бабеша - Негри, ИФ и др. Однако и она в отдельных случаях оказыва­лась отрицательной, несмотря на подтверждение диагноза Б путем обнаружения телец-включении и ИФ. Процент отрицательных результатов по биопробе колебался от 1,3 до 12.

Сведения о различной эффективности биопробы могут быть объяснены рядом факторов: выбора экспериментального животного, количества их в опыте, способа заражения, способа и срока хранения материала до поступления в лабораторию. Может играть роль и явление интерференции инфекционных частиц неактивными частицами, если для инокуляции ис­пользуют недостаточно разведенный материал.

В мозге и слюнных железах лисиц и скунсов, павших от бешенства, обнаружено вещество, ингибирующее инфекционность вируса, что не позволяет провести диагностику болезни у этих животных методом внутримозгового заражения мышей. Наличие ингибирующего вещества в исследуемом материале не препятствует выявлению вирусного АГ методом ИФ; для скун­сов и лисиц это самый чувствительный метод диагностики.

Из животных всех видов (кролики, морские свинки, взрослые белые мыши и хомячки), использованных для биопробы, многие отдают предпочтение мышам-сосунам, поскольку они более чувствительны к разным штаммам ВБ и менее опасны в работе. Сирийские хо­мячки по чувствительности не уступают мышам, но они менее доступны.

РСК. Выявление специфического АГ в РСК при диагностике бешенства применяется реже, чем другие методы. Из присланного для исследования мозга готовят АГ. Для этого мозговую ткань (особенно богаты АГ, связывающим комплемент, кусочки таламуса и стволового от­дела мозга) растирают в вероналовом буфере в соотношении 1:10 и оставляют при комнат­ной температуре на 1 ч, после чего суспензию инактивируют при 56°С в течение 5 ч. Такая обработка убивает вирус и снимает антикомплементарность мозговой ткани, не повреждая специфический АГ. Суспензию центрифугируют 15 мин при 3500 мин- 1 из надосадочной жидкости, которая представляет собой материал для исследования на наличие АГ, готовят 2-кратно возрастающие разведения от 1:2 до 1:64 и используют для исследования в РСК.

ИФА. В ИФА специфическое окрашивание АГ в клетках мозга павших от бешенства животных выявляют как в свежевзятых, хранившихся в глицерине, а также в пробах, хранившихся без глицерина при 20°С 8-18 ч. Данный тест пригоден для рутинной диагностики бешенства у животных, для выявления АГ ВБ в тканевых парафиновых срезах при фиксации препаратов 10%-ным р-ром формалина с рН 5,3 и последующей обработки препаратов, заключенных в парафин, пепсином.

В отличие от РН на мышах и в культуре клеток ИФА позволяет выявить AT у животных в течение нескольких часов, ИФА - наиболее перспективный лабораторный метод обнару­жения AT и индикации самого вируса. Экспресс-методом диагностики бешенства является тех­ника захвата и метод ИФ для выявления АГ ВВ. Доказано, что метод выявления АГ ВБ в парафинизированных срезах пероксидазо-антиперокисдазным методом значительно пре­восходит метод ИФА. В 1987 г. создан набор для быстрой энзимиммунодиагностики бешенства (RREID), приемлемый для эпидемиологических и лабораторных исследований.

Вариантная идентификация с помощью монАТ. С помощью монАТ к гликопротеинам ВБ селектированы АГ варианты, среди которых выделены фенотипически термола­бильные (авирулентные) варианты. При использовании 2-х групп монАТ показано, что штаммы дикования отличаются от шт. Fixe (Пастера), CVS, Flury HEP, ERA и "утиных" штаммов по АГ детерминантам. Изучение с помощью монАТ 7-ми штаммов, выделенных от больных Б людей, позволило выявить определенные отличия их от вакцинного штамма в отношении АГ детерминант.

Общепризнано, что AT отличия между дикими штаммами удается обнаружить, исполь­зуя монАТ против нуклеокапсидного AT N, которые реагируют с цитоплазматическими включениями зараженных вирусом клеток; против гликопротеина (G АГ), которые реаги­руют с мембранами инфицированных клеток, лизируют эти клетки в присутствии компле­мента и нейтрализуют вирус. В связи с возможной АГ вариабельностью поверхностного гликопротеина ВБ из различных географических зон в качестве протективного АГ исполь­зовали рибонуклеопротеин, характеризующийся консервативностью АГ структуры. Таким образом, не только G белок, но и РНП ВБ обладают протективной активностью.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика . Эти методы для бешенства нетипичны, поскольку используются только с целью проверки поствакцинального иммунитета. Для обнаружения и титрования поствакцинальных AT ис­пользуют РН, которую ставят общепринятым методом. В качестве АГ используют фиксиро­ванный ВБ. РН на клетках ВНК-21 была более чувствительной, чем непрямая ИФ при выяв­лении AT в сыворотках вакцинированных лис. Кроме того, предложены РТГА и ELISA.

РТГА. Пока еще не нашла широкого применения в диагностической практике из-за на­личия в сыворотках крови неспецифических ингибиторов, к которым ВБ высокочувствите­лен, а главное, ГА АГ, не подвергавшиеся достаточной очистке, обладали низкой чувстви­тельностью. Для приготовления ГА АГ ВБ предложено использовать шт. Москва, выращен­ный в культуре клеток ВНК-21, после его обработки сапонином с последующей очисткой и концентрированием. ГА отделяют от других компонентов вириона ультрацентрифугирова­нием. Полученный препарат имел степень очистки 99,92%, обладал высокой ГА активно­стью (1:128), хорошо сохраняющейся в течение 1 мес при рН 5-9.

Перед постановкой РТГА следует проводить умеренную 2-кратную трипсинизацию гу­синых эритроцитов для их сенсибилизации. При использовании 0,25%-ной взвеси трипси-низированных эритроцитов (лучше 10 7 клеток в 1 мл) чувствительность РТГА повышается в 4 раза. Для разбавления АГ и сывороток применяют боратно-солевой р-р (рН 9) с добавле­нием 0,4% бычьего сывороточного альбумина. Взвесь эритроцитов готовят в солевом р-ре с кислым рН, чтобы после соединения со смесью вируса и сывороток, рН которой 9, оконча­тельный рН установился бы в пределах 6,2. После внесения в лунки суспензии эритроцитов панель встряхивают, заклеивают прозрачной пленкой и ставят на лед. Результаты РТГА учитывают через 40-50 мин, а с эритроцитами 2-дн цыплят или макаки-резус - через 1-1,5 ч.

Разработан радиоиммунологический анализ, основанный на способности AT связы­ваться с меченым 125 1-АГ ВБ. Меченый IgG, выделенный из антирабической гипериммун­ной сыворотки, можно применять для обнаружения АГ ВБ твердофазным РИА. Лучшие ре­зультаты получены при использовании фосфатно-солевого р-ра (рН 6,0) с ионной силой 0,01 М и меченого IgG с активностью 200-250 тыс. имп./мин.

Твердофазный конкурентный РИА применим для выявления антирабических AT в сы­воротке и гибридомных супернатантах.

Дифференциальная диагностика . Необходимо исключить болезнь Ауески, при кото­рой больные животные неагрессивны, не бывает извращения аппетита. У собак исключают нервную форму чумы. Подозрение на бешенство может возникнуть при инфекционном энцефаломие­лите лошадей. Комплекс лабораторных исследований позволяет поставить точный диагноз на бешенство. Предложен новый метод дифференциации различных штаммов ВБ, основанный на рестриктазном расщеплении продуктов амплификации в ПЦР сегмента гена N.

Бешенство – с древних времен и до наших дней считается одним из самых страшных, смертельных заболеваний, общим для животных и человека, особенно ввиду того, что источником заражения может выступать лучший друг человека - собака.

Несмотря на то, что количество случаев бешенства в разных странах постоянно уменьшается в связи наличием эффективной вакцинации и другими мероприятиями, в современном мире бешенство собак по-прежнему остается серьезной проблемой. По данным ВОЗ (Всемирная организация здравоохранения) от бешенства ежегодно погибает от 50000 до 100000 человек, в основном это страны Азии и Африки, и более 15 миллионов людей получают лечение после покусов животных, подозреваемых в заболевании бешенством. Участились случаи заболевания бешенством во Вьетнаме, Китае, Индонезии, Ларсе, Филиппинах.

Вирус бешенства способен заражать любое млекопитающее, но чаще встречается у плотоядных. В России он преимущественно распространен у:

• Лисиц
• Енотовидных собак
• Волков
• Хорьков
• Собак
• Кошек
• а также- ежей.

В Европе наиболее значительным из поражаемых видов животных является рыжая лиса, в Азии – домашняя собака, в США – скунсы, лисы, еноты.

Во всем мире встречаются различные антигенные варианты вируса бешенства.

Восприимчивость в зависимости от вида животного различается очень сильно и является выше, например, у лисиц, барсуков, кроликов, чем у собак Различают 3 степени восприимчивости домашних животных к вирусу бешенства:

1. Высокая (кошки, крупный рогатый скот)
2. Средняя (собака, овцы, лошади, козы)
3. Низкая (птицы)

Во многих частях мира, включая Европу и Америку, переносчиками вируса также являются летучие мыши. Однако бешенство среди них существует в основном как независимый цикл и, как правило, не связан с наземным бешенством, хотя переход инфекции из одного ареала в другой может происходить и происходит. Так в Латинской Америке основным источником инфекции для крупного рогатого скота являются летучие мыши, в то время как для людей- собаки, а в Шри-Ланке- куницы.

Различают:

• Лесное бешенство (т.е. в дикой природе)
• Городское (т.е. в городе, преимущественно это безнадзорные собаки)

Ранее основными источниками и носителями этой инфекции при городском типе бешенства были собаки. Бешенство встречается по всему миру, за исключением Австралии, Новой Зеландии. Благодаря карантинным и профилактическим мерам Великобритания (окончательное устранение бешенства в этой стране произошло в 1922г.), Ирландия, Гавайские острова, Япония, Мальта, Кипр, Норвегия, Швеция, Португалия, Финляндия свободны от заболевания. В Испании в 2013 г. зарегистрирован случай бешенства у собаки, покусавшей 5 человек (4 ребенка и 1 взрослый), подобных инцидентов в Испании не было с 1978 г.

В настоящее время до въезда в ряд зарубежных стран требуется проведение индивидуального серологического теста на наличие нейтрализующих антител с титром не менее 0,5 МЕ/мл, а после въезда обязательным является длительный карантин. Сейчас бешенство чаще регистрируется среди диких животных.

Штаммы (разновидности) вируса бешенства специфичны к определенному виду дикого животного, но все они могут передаваться человеку, собакам и кошкам.

Как происходит заражение бешенством

Заражение осуществляется большей частью напрямую через слюну больного животного путем укуса или ослюнения поврежденных слизистых оболочек или кожи, далее вирус попадает в мышечную ткань. Примерно в течение суток вирус здесь размножается, проникая затем в нервные волокна. В нервах вирус продвигается с максимальной скоростью 7 см/день в направлении спинного или головного мозга (чаще это не менее 18 дней). В исключительных случаях вирус может добраться до головного мозга через кровь. Размножение вируса происходит главным образом в головном мозге, благодаря чему вирус быстро распространяется от клетки к клетке, распространяясь по нервам ко всем органам, в особенности в слюнные железы и глаза. Непрямое перенесение вируса возможно ввиду длительного устойчивого существования вируса в трупах животных (до 90 дней) и холодных, затененных местах, но данный путь распространения играет незначительную роль.

В США были зарегистрированы случаи заражения человека, койотов, лисиц бешенством воздушно-капельным путем- после посещения пещер, густо заселенных зараженными летучими мышами (Winkler,1975).Но в то же время некоторые собаки и кошки, попавшие в те же самые условия не заражались.

В лабораторных условиях вирус бешенства передавался оральным путем (попадание вируса происходит через рот, в основном при приеме зараженной пищи, воды) лисам и скунсам.

В Арктике было отмечено заражение собак от поедания трупов зараженных лисиц (Charlton , 1988).

Важным следствием обнаружение орального пути заражения бешенством стала разработка оральных вакцин (специальные приманки для поедания) против бешенства для диких животных.

Инкубационный период от 2 недель до 2 мес, в редких случаях до 6 мес- 1 года. У человека описаны единичные случаи крайне продолжительного инкубационного периода: у 2 выходцев из Лаоса и Филиппин инкубационный период составил 4 и 6 лет после эмиграции в США, выделенные у них штаммы вируса отсутствовали у животных в США, но присутствовали в странах откуда они иммигрировали. Длительность инкубационного периода зависит в том числе от места укуса: наиболее опасными в плане заражения являются голова, конечности, половые органы, так как они богаты нервными волокнами.

Основное выделение вируса происходит со слюной больного животного, в незначительных количествах – через мочу, испражнения.

Важно! Большое значение играет тот факт, что выделения вируса возможно иногда уже в период с 1-го по 13-й день до появления клинических признаков.

Симптомы бешенства у собак

Классическое представление о том, что бешенство протекает в 3 четко различающихся фазах, верно лишь отчасти. Довольно часто встречаются нетипичные формы бешенства , что существенно затрудняет диагностику этого заболевания.

Классическое течение бешенства:

1. Продромальная стадия : проявляется изменением поведения, длится от нескольких часов до 4 дней. Собака становится капризной или очень дружелюбной, или наоборот - избегает людей, пуглива, пытается спрятаться, без причины лает или кусается, возможно появление зуда на месте укуса.
2. Стадия возбуждения : характеризуется агрессивностью и стремлением к блуждающим перемещениям (буйная форма бешенства, продолжительность 1-4 дня). Нарастает беспокойство и переменчивость настроения. Появляется отказ от еды (анорексия), разгрызание посторонних предметов (так называемый извращенный аппетит), слюнотечение, лай становится хриплым. Повышенная агрессивность и стремление убежать, рыскание по окрестностям и нападение на других собак, людей. Возможно нарушение координации движений и приступы судорог.
3. Паралитическая , или депрессивная стадия: характеризуется прогрессирующими параличами, в том числе конечностей, глотки. Наступает за 3-4 дня до смерти.

Нетипичные формы бешенства:

• «Тихое бешенство » - без предшествующей стадии возбуждения развиваются параличи. «Тихая» форма встречается все чаще и доминирует в некоторых регионах. Симптомы: невыразительный, тупой взгляд, собака безучастно присаживается, где попало, характерно слюнотечение, отвисание нижней челюсти, охрипший голос, неспособность принимать и глотать пищу, может наблюдаться выпадение 3 века, косоглазие, разный размер зрачков. В завершении наступает паралич туловища, конечностей и смерть.
• Атипичное бешенство – хроническое, длящееся до 3 мес - 1 года, субклиническое течение. Симптомы: в начале поносы или паралич кишечника, затем явления гиперстезии (повышенная чувствительность к раздражителям), параличи, нарушение моторики, депрессии, за которыми следует временное или длительное улучшение. Диагноз можно поставить только посмертно.

Диагностика

Посмертная. В лаборатории исследуется мозг больного животного на:

1. Выявление в срезах головного мозга телец Бабеши-Негри (точность 40-50%). Отсутствие телец Бабеши-Негри не исключает наличие болезни.
2. Выявлении антигена при проведении иммунофлуоресцентного анализа срезов головного мозга
3. Биопробе – заражают мышей суспензией из тканей мозга павшего животного и наблюдают в течение 28 дней до гибели.

Порядок действий при подозрении на бешенство

Вследствие высокой опасности бешенства для человека и животных диагноз бешенства необходимо рассматривать в качестве возможного, когда присутствуют определенные клинические признаки. Часто бешенство не имеет классического течения. Нельзя забывать, что существует большое количество болезней, при которых у собаки могут появляться симптомы, сходные с симптомами бешенства - нарушение координации движений, слюнотечение и пр.: инфекционные заболевания, болезни нервной системы, опухоли, инородные тела в ротовой полости и глотке и др.

Собаку с подозрением на бешенство необходимо держать в изоляции там, где проводился его осмотр, о поступлении данного животного требуется незамедлительно оповестить государственную ветеринарную службу (Примечание: государственная Станция по борьбе с болезнями животных - СББЖ). Прием останавливается, адреса и имена всех, кто в данный момент находился в месте или контактировал с данным животным регистрируются.

Все лица, имевшие контакт с подозрительным по заболеванию бешенством животным должны пройти полную личную дезинфекцию с помощью мыла или моющего средства, заменить зараженную одежду. В случае, если больное животное поцарапало или покусало кого-либо- рану следует немедленно промыть струей воды с использованием моющего средства или мыло, после чего обработать спиртом или йодом и обратится в медицинское учреждение.

Бешенство (Rabies) – инфекционное заболевание, опасное для животных и человека. Данное заболевание встречается во всех странах мира. Характеризуется 100% летальным исходом.

Возбудитель – РНК-содержащий вирус, относящийся к семейству Рабдовирусов. Данный вирус имеет тропность к нервной ткани. В наибольших титрах обнаруживается в головном мозге больных животных. Кроме того, находят вирусы и в спинном мозге, слюнных и слезных железах.
Различают:

1. «дикий» вирус, который циркулирует в естественных условиях и характеризуется высокой патогенностью для человека и животных.
2. И «фиксированный», полученный в лабораторных условиях, не патогенный для животных и человека при экстраневральном введении.

Вирус бешенства не устойчив к высоким температурам: при 60С о инактивируется через 10 минут, при 100С о - почти мгновенно. Но вот в замороженном мозге может сохранять жизнеспособность до нескольких месяцев. Также сохраняется несколько месяцев в гниющих тканях. Устойчив к действию растворов йода. Но быстро инактивируется дезрастворами на основе формалина, хлорамина и щелочи.

Эпизоотологические данные.

К вирусу бешенства восприимчивы все теплокровные. Наибольшей чувствительностью обладают дикие собачьи (такие как: лисицы, песцы, волки, енотовидная собака, шакалы), куньи, грызуны кошки. Менее восприимчивы птицы.

В дикой природе резервуарами вируса бешенства являются хищные животные и летучие мыши, в городе - бродячие собаки.
Источником заражения являются больные животные, у которых вирус выделяется со слюной. Наличие вируса в слюне отмечают уже за 8-10 дней до появления признаков болезни. Заражение происходит при укусе, при попадании слюны на слизистые оболочки или на поврежденные участки кожи.

Патогенез .

После проникновения в организм вирус начинает размножаться в месте внедрения. И через 24 часа начинает проникать в нервную ткань. В нервах он продвигается в направлении спинного и головного мозга со скоростью 7 см/день. Добравшись до мозга вирус начинает усиленно размножаться, затем по нервам вирус попадает во все органы и в первую очередь в слюнные железы и глаза. Инкубационный период (от момента заражения до появления клинических признаков) составляет в среднем 14 – 60 дней, иногда может достигать 6-12 месяцев.
Клинические признаки.

Различают 3 вида течения болезни.

1. Классическое трехэтапное течениеили буйная форма . Вначале отмечается изменение поведения животного (1 этап), оно становится очень ласковым или наоборот пугливым, необщительным. Этот этап может длиться от нескольких часов до 4 дней. Затем наступает следующий этап - возбуждения (2 этап), который продолжается 1-4 дня. Животные становятся агрессивными, склонны к блуждающим передвижениям и нападением на животных и людей. Развивается анорексия, беспокойство, слюнотечение. И за 3-4 дня до смерти развиваются паралитическая, или депрессивная, стадия, характеризующаяся прогрессирующими параличами.
2. Паралитическая, или тихая, форма. Характеризуется развитием параличей без предшествующей стадии возбуждения. При этой форме отмечают слюнотечение, отвисание нижней челюсти, затрудненное глотание, анорексию. Затем развивается паралич мышц туловища и конечностей. Смерть животного наступает через 3-4 дня.
3. «Атипичное бешенство». Это хроническое субклиническое (без развития симптомов) течение болезни, которое может длиться до 3 месяцев.

Диагноз .

Предварительный диагноз ставят на основании анамнеза и клинических симптомов. При подозрении на бешенство после смерти животного в лабораторию направляют труп животного. При невозможности этого – голову или головной мозг. При взятии материла необходимо соблюдать строгие меры предосторожности!
Лабораторная диагностика бешенства включает в себя несколько методов исследования.

1. Обнаружение телец Бабеша-Негри. Для постановки диагноза на бешенство в лаборатории проводят гистологическое исследование головного мозга умершего животного. Отмечают наличие рабических узелков в структурах дна четвертого желудочка мозга и наличие в головном мозге телец Бабеша-Негри (цитоплазматические эозинофильные включения, состоящий из частиц вируса бешенства). Их можно обнаружить в гипокампе, корковых и стволовых структурах мозга, в мозжечке и дорсальных ганглиях спинного мозга и эпителии роговицы глаза. Однако если тельца Бабеша-Негри не обнаруживаются, бешенство не исключается.
2. Выявление антигена методом флюоресцирующих антител (МФА) или методом иммунофлюоресцентного анализа (ИФА). Кроме этих реакций в настоящее время идет разработка нового метода диагностики в полимеразной цепной реакции (ПЦР).
3. Биологическая проба с заражением новорожденных мышат вирусом из взвеси головного мозга, слюнных желез.

Согласно законодательству РФ, в случаях покусов людей собаками или другими животными (кроме явно больных бешенством) пострадавшие должны немедленно обратиться в медицинские учреждения. А покусавшие их животные должны быть доставлены в ближайшее государственное ветеринарное учреждение для осмотра специалистами и карантина в течение 10 дней.

Для профилактики распространения бешенства предусмотрена ежегодная обязательная вакцинация собак и кошек антирабическими вакцинами.

В настоящее время для ввоза животных в ряд стран требуется документ подтверждающий количество валидных антител к вирусу бешенства. Для эффективной защиты от бешенства минимальный уровень вируснейтрализующих антител в крови должен составлять не менее 0,5 МЕ/мл. Данный вид исследования не является диагностическим и предназначен только для определения напряженности иммунитета против бешенства.
В Москве сдать кровь для определения титра антител к вирусу бешенства можно в Центре Молекулярной Диагностики, расположенном на Звенигородском шоссе, д.5. ЦДМ получил международную аккредитацию на проведение данного теста и выдает Международные сертификаты, действительные в течение всей жизни животного при соблюдении сроков ревакцинации.

Определение титров антител проводят не ранее чем через 30 дней после вакцинации. Поэтому если Вы планируете выезжать со своими питомцами в страны ЕС или другие страны, то необходимо заранее позаботиться о вакцинации и сдаче крови на этот тест (результаты выдаются через 7-14 дней).

Врач-лаборант ветеринарной лаборатории
«БиоВетЛаб» Лазарева Н.В.

Анализы на бешенство

Бешенство собак — заболевание, вызываемое вирусом Rabies virus. Этот вирус поражает нервные клетки и передается со слюной при укусе и через поврежденную кожу и слизистые оболочки. Особая опасность заключается в том, что бешенство опасно для всех видов домашних и диких теплокровных животных, и человека. При появлении клинических признаков летальность составляет почти 100%. От момента попадания вируса в организм до первых симптомов может пройти от нескольких дней до года. При экстренной вакцинации сразу после укуса обычно болезнь не развивается. Клинически это заболевание у собак проявляется отказом от еды, водобоязнью, агрессией или наоборот излишне ласковым поведением, затем появляются судороги и животное погибает. От момента появления первых симптомов редко проходит более 10 дней.

В соответствии с Санитарными правилами СП 3.1.096-96 и Ветеринарными правилами ВП 13.3.1103-96:

• «5.1. Диагноз «бешенство» ставят на основании комплекса эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований.
• 5.2. Для исследования на бешенство в лабораторию направляют свежий труп или голову мелких животных, а от крупных — голову или головной мозг.»

Способы исследовать животное на бешенство

• Микроскопическое исследование головного мозга для выявления телец Бабеша- негри.
• Метод флюоресцирующих антител (МФА). Для этого исследуют головной мозг или роговицу. Особенность данного исследования в том, что можно провести исследование живого животного в течении всего нескольких часов. Для данного исследования животное надежно фиксируют и под местным анестетиком делают несколько мазков-отпечатков с роговицы. После чего обрабатывают стекла антирабической сывороткой меченной флюоресцирующей краской и исследуют в люминесцентном микроскопе. К сожалению, в Красноярске данный метод не проводится.
• Биологическая проба – заражение мышей.

В связи с тем, в РФ нередко выявляются случаи заражения бешенством домашних и диких животных, то для ввоза наших животных в некоторые страны, необходимо соблюдать особые условия. Стандартным является наличие ежегодной вакцинации у чипированного животного с обязательной отметкой в паспорте. Но для стран Евросоюза, Тайваня, Японии, ОАЭ, Израиля необходимо еще и тест на количество антирабических антител в крови животного. Зачем проводится это исследование? Антитела – это специфические белки в организме животного, которые уничтожают вирусы. Дело в том, что антитела начинают вырабатываться в организме животного сразу после вакцинации, течении трех недель они повышаются, а потом постепенно снижаются. Большинство импортных производителей вакцин от бешенства гарантируют достаточно высокий уровень антител в крови животного до трех лет при соблюдении инструкции. Напряженность иммунитета(количество антител) зависит от многих факторов: общего состояния здоровья животного, скорости иммунной реакции, качества вакцины и многих других. Обычно уровень антител в крови должен быть не менее 0,5 МЕ/мл. Перед переездом нужно внимательно ознакомиться с условиями въезда в страну заранее. Важно! Исследование на уровень антител может выполнять только лаборатория, прошедшая международную аккредитацию в референс центре AFSSA в Нанси, Франция.

Список аккредитованных лабораторий:

• г.Владимир, мкр. Юрьевец, ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)
• г.Москва, 2-ой Рощинский проезд, д.8, стр.5, этаж 1, комнаты 2,3,18.ООО «НовиСтем»
• Россия, Владимирская область,Петушинский район, ПГТ Вольгинский,ул. Старовского, д. 27ООО «Институт Биотехнологий Ветеринарной Медицины» («ИБВМ»)
• ФГБУ «ВГНКИ» г. Москва, Звенигородское щоссе 5
• г.Москва, ул. Гамалеи, д. 16, стр.2 НИИ профилактики болезней человека и животных

Для того чтобы пройти это исследование на бешенство, ваше животное должно быть:

• старше 4 месяцев
• чипировано
• привито от бешенства (не ранее чем 30 дней назад и 2 месяца до окончания срока действия вакцины)

Во многих странах при ввозе животных из России необходимо ни только паспорт с своевременно поставленной вакциной, но и анализ, подтверждающий высокий титр антител. Данный анализ можно сделать в указанных выше лабораториях России. В удобное для Вас время в нашей ветклинике необходимо сдать кровь для получения сыворотки, затем мы опечатаем пробу в вакуумную пробирку и готовим сопроводительное письмо с копией ветеринарного паспорта (заполненным на английском языке) в строго вертикальном положении. Хранится кровь либо в замороженном виде, либо при температуре +4С +8С в течение 9 суток. Исследование проводится от 3 дней до 2 недель.